貨號：WTA4762，產(chǎn)品名稱：小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒sigma代理，英文名稱：Mouse β-Defensins,β-DF ELISA Kit，品牌：進口原裝/國產(chǎn)
注意：本公司所銷售 小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒sigma代理 ，僅用于科研實驗，不,人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒,可用于食品或者臨床，食用藥品等等。
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ELISA 試劑盒說明 ：

1 ．檢測原理：采用雙抗體夾心 ABC-ELISA 法

2 ．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。

3 ．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

4 ．試劑盒保存： -20 ℃ （較長時間不用時）； 2-8 ℃ （頻繁使用時）。

5 ．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

該 Elisa 試劑盒可檢測樣本：血液標本，組織液標本，尿液標本，糞便標本，腦脊液標本，胸腹水標本等（具體詳細情況請咨詢）

Elisa 試劑盒操作步驟（具體操作以說明書為準）：

實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 μ l ，余孔分別加標準品或待測樣品 100 μ l ，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜， 37 ℃ 反應(yīng) 120 分鐘。

為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100 μ l （取 1 μ l 生物素標記抗體加 99 μ l 生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制）， 37 ℃ ,60 分鐘。

3. 溫育 60 分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3 次，每次浸泡 1-2 分鐘， 350 μ l/ 每孔，甩干。

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液） 100 μ l ， 37 ℃ ， 60 分鐘。

5. 溫育 60 分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘， 350 μ l/ 每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液 90 μ l ， 37 ℃ 避光顯色（ 30 分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色，后 3-4 孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液 50 μ l ，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在 450nm 波長依序測量各孔的光密度（ OD 值）。 在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行檢測。

注：

1. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是最后加底物溶液及 2N H2SO4 。測量時先用此孔調(diào) OD 值至零。

3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜。

4. 未使用完的酶標板或者試劑，請于 2-8 ℃ 保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。

5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。

Elisa 試劑盒檢測范圍（請 來 dian 咨詢索取）

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